matrigel基質膠的使用方法

　　

　　產品特性：

　　Matrigel基質會有色差變化（淡黃色到深紅色），是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的，但是與5％CO2平衡后色差即會減少。凍融后，輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無菌環境下進行，試劑瓶瓶蓋可用70％乙醇擦拭，并自然干燥。應使用預冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質層表面生長，也可在1mm厚度的Matrigel三維基質內生長。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質的蛋白層，可以用于細胞貼壁，但不能用于細胞的分化研究。

　　

　　matrigel基質膠的使用方法：

　　特別注意：基質膠在22-35℃能夠快速成膠。為了保證Matrixgel基質的成膠性能與穩定性，最終稀釋濃度不應低于3mg/ml（液的濃度因批次不同有差異）?？捎脽o血清培養基來稀釋Matrixgel，稀釋后需要立即使用。

　　A.薄膠制備方法

　　1）融化后，用預冷的槍頭混勻Matrixgel基質。

　　2）將需要使用的培養板置于冰上，按50μL/cm2生長面積的濃度加入Matrixgel基質。

　　3）在37℃放置30分鐘，此時平板即可使用。

　　

　　B.厚膠制備方法

　　1）融化后，用預冷的槍頭混勻Matrixgel基質。

　　2）將需要使用的培養板置于冰上，將培養的細胞與Matrixgel基質混合，用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150－200μL/c的濃度加入Matrixgel基質。

　　3）在37℃放置30分鐘，此時即可加入細胞培養液。細胞也可生長在此厚膠的上層。

　　

　　C．薄層包被方法

　　1）融化后，用預冷的槍頭混勻Matrixgel基質。

　　2）采用無血清培養基稀釋Matrixgel基質到需要的濃度。建議根據具體的實驗做個梯度實驗，從而確定最佳的包被濃度。

　　3）將稀釋的Matrixgel基質加入需要包被的培養器皿中，包被量至少覆蓋細胞的所有生長表面。室溫下孵育1小時。

　　4）去除未凝固結合的Matrixgel基質，用無血清培養基輕輕地沖洗。此時平板即可使用。